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显微镜工作距离也叫物距（W.D.，Working Distance)：指试样调准焦点时的物镜前缘与试样表面（或物镜使用盖玻片时，与盖玻片顶面）的距离。
在物镜数值孔径一定的情况下，工作距离短孔径角则大。 数值孔径大的高倍物镜，其工作距离小。所以定义显微镜工作距离大小，主要看物镜的参数。若需要长工作距离的进行观察，可选择长工作距离物镜（一般选配倒置显微镜）
